Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞的原代培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)步驟

Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞的原代培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)步驟
　　(1) (Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)開始前向小鼠腹腔注射0.5ml含40μg刀豆球蛋白a的磷酸鹽緩沖液（PBS）。

　　(2) 3天后，斷頸處死小鼠，75%酒精消毒小鼠皮膚。

　　(3) 置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè)，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。

　　(4) 再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10ml 無菌PBS液注入腹腔中，同時從兩側(cè)用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內(nèi)充分流動。

　　(5) 用針頭輕輕挑起腹壁，使動物體微傾向一側(cè)，使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內(nèi)。

　　(6) 小心拔出針頭，把液體注入離心管中，1000r/min 4℃離心10分鐘，棄去上清液，重復(fù)兩次，加入完全培養(yǎng)液重懸。

　　(7) 將濾液進(jìn)行臺盼藍(lán)拒染試驗(yàn),(Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板鏡下計(jì)數(shù)。以 8.0 ×104至 1.0 ×105/mL的密度將細(xì)胞以 400μl/孔接種到預(yù)先用L-多聚賴氨酸包被的24 孔培養(yǎng)板或 100μl/孔接種 96 孔培養(yǎng)板。

　　(8) 用含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)24-48 h直到融合。

　　注意事項(xiàng)：

　　腹腔注射時PBS可以用20ML注射器，每只老鼠注射10ML；切勿注射入內(nèi)臟，會使腹腔液中紅細(xì)胞增多，同時可能污染；注射后，要多揉一下再取液；

尊敬的客戶：

　　本公司還有AAV-293細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞產(chǎn)品，您可以通過網(wǎng)頁撥打本公司的服務(wù)電話了解更多產(chǎn)品的詳細(xì)信息，至善至美的服務(wù)是我們的追求，歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品，我們將竭誠為您服務(wù)！

上一篇：化學(xué)合成多肽的基本介紹
下一篇：人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞是什么

天天搞天天色-天天更新天天久久久更新影院-天天狠操-天天狠狠操-天天狠狠色综合图片区-天天狠天天操

Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞的原代培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)步驟