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貂肺上皮細胞的培養方法

貂肺上皮細胞的培養方法
  1)表皮細胞培養
  1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。
  2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。
  3.(貂肺上皮細胞)冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。
  4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。
  5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鐘。
  6.用吸管輕輕反復吹打,使成細胞懸液。
  7.(貂肺上皮細胞)培養液:通過80目不銹鋼紗網濾過后,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成細胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養。

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