U2OS細胞的培養(yǎng)

U2OS細胞的培養(yǎng)
　　本發(fā)明構建了能穩(wěn)定表達C-Myc-ER融合蛋白的U2OS細胞株。C-Myc作為一個癌基因，同時又是一個轉錄因子，能夠調控細胞內15%的基因轉錄，參與到細胞內的很多生命活動中，比如細胞增殖、凋亡、等過程，也涉及到腫瘤的發(fā)生和進展等病理過程。該細胞可以通過加入4-OHT，激活C-Myc發(fā)揮轉錄因子活性。

細胞培養(yǎng)

　　病毒包裝細胞Plat-E細胞，骨肉瘤U2OS細胞，培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基中（含10 %肽牛血清、100 U/ml青霉素、100 ug/ml鏈霉素），將培養(yǎng)瓶放置于37°C、5 % CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每1-2天更換培養(yǎng)基一次。當細胞生長到覆蓋瓶底壁80 %時，用0.25 %胰蛋白酶消化貼壁細胞，傳代后繼續(xù)放置于培養(yǎng)箱中。

重組質粒構建

　　C-Myc-ER基因片段合成，經(jīng)PCR擴增后，用BamH I和EcoR I雙酶切PCR產(chǎn)物和pBABE質粒，然后用T4連接酶連接片段和質粒，置于12°C過夜，**天用感受態(tài)細菌E.coli DH5α轉化，涂抹于含青霉素（100 ug/ml）的LB瓊脂糖培養(yǎng)板，置于37°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)12-14小時，挑取單克隆，用含青霉素的LB培養(yǎng)液中培養(yǎng)12-14小時，轉速為280 rpm，培養(yǎng)溫度為37 °C。用質粒小提試劑盒提取質粒后用BamH I和EcoR I酶切鑒定并送測序。

尊敬的客戶：

　　本公司還有5637細胞、ARPE-19細胞、人臍靜脈血管內皮細胞產(chǎn)品，您可以通過網(wǎng)頁撥打本公司的服務電話了解更多產(chǎn)品的詳細信息，至善至美的服務是我們的追求，歡迎新老客戶放心選購自己心儀產(chǎn)品，我們將竭誠為您服務！

上一篇：人臍靜脈血管內皮細胞簡單介紹
下一篇：T2細胞培養(yǎng)條件

天天搞天天色-天天更新天天久久久更新影院-天天狠操-天天狠狠操-天天狠狠色综合图片区-天天狠天天操

U2OS細胞的培養(yǎng)