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貂肺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法(五)
貂肺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法(五)
6)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(貂肺上皮細(xì)胞)培養(yǎng)
腫瘤條件培養(yǎng)基制備:
1.取C3H小鼠的S-180實體肉瘤組織。
2.胰蛋白酶消化,Dulbecco改良Eagle氏培養(yǎng)液15ml(含10%小牛血清),接種到T-75 Falcon產(chǎn)培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3.在(貂肺上皮細(xì)胞)細(xì)胞生長接近完全匯合時,收集培養(yǎng)液制成條件培養(yǎng)基;再用含10%小牛血清的新培養(yǎng)液后,也每隔兩天收集一次,可獲得多量條件培養(yǎng)。
4.4000轉(zhuǎn)/分離心后,再通過0.22μm微孔濾膜濾過,-20℃凍存?zhèn)溆茫ㄅR用前融解)。
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