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人臍靜脈細胞融合細胞接種培養(yǎng)

人臍靜脈細胞融合細胞接種培養(yǎng)
  1、細胞接種:
  (1)、包被液:用去離水配制0.5%明膠溶液,過濾除菌。
  (2)、培養(yǎng)瓶包被:取2-4個T25培養(yǎng)瓶,每個培養(yǎng)瓶加2-3ml0.5%明膠溶液,搖勻使包被液布滿培養(yǎng)瓶底面,置37℃2小時或放置過夜。
  (3)、接種細胞(人臍靜脈細胞融合細胞):接種前吸凈包被液,按2500-5000個細胞/cm接種細胞(1支5×10個細胞可接種2-4個培養(yǎng)瓶),每瓶加培養(yǎng)液3-5ml,搖勻后置37℃5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時,此時細胞已完全貼壁,更換培養(yǎng)液后繼續(xù)在37℃5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
  (4)、擴大培養(yǎng):一般每周更換培養(yǎng)液2次,至(人臍靜脈細胞融合細胞)細胞長至覆蓋培養(yǎng)面的70-80%可進行傳代或凍存。

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